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          滅菌后小導管內留有氣泡的原因分析及其解決辦法

          時間:2024-11-01      來源:admin      點擊:167次

          大腸菌群(大腸桿菌)檢測實驗培養(yǎng)基(LST)滅菌時,偶爾會有小氣泡留在小導管內,導致培養(yǎng)基不能使用。重復滅菌不僅費時費電,還會破壞培養(yǎng)基的成分。 

          原因一:過早打開滅菌鍋

          當滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時,不要打開滅菌鍋。因為打開鍋蓋瞬間,鍋內大量熱量散出,溫度突然降低,試管內溫度也隨著降低,導致管內氣壓減小,沸點降低,部分水會汽化留在小導管內。

          原因二:試管塞塞得太緊(使用硅膠塞的時候)

          試管塞塞得太緊在滅菌時會導致試管內與滅菌鍋內壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內壓力會大于管內壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內壓力小于管內壓力。鍋內壓力會大于管內壓力時,試管內壓力不夠,不能將小導管內氣體排盡,就留有氣泡;鍋內壓力小于管內壓力時,可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報廢。

          原因三:小導管口太小或者太長

          我們可以把一根毛細管一端封口,另一端插進水里,毛細管里怎么都不會進水。同樣把一個燒杯倒扣進水里就很容易進水了。小導管在加壓后一方面水要進去,另外里面的空氣要出來,如果口太小的話,空氣不容易出去,水也不容易進來,就會導致氣泡留在里面了。

          原因四:培養(yǎng)基質量引起

          由培養(yǎng)基質量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產氣的成分。滅菌時用水做培養(yǎng)基組的對照試驗,若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是有此原因引起。

          原因五:滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能排盡

          滅菌鍋最大壓力不夠不能使管內液體強行把氣體擠出,最后還留有小氣泡,還會使溫度上升緩慢,或達不到滅菌溫度。此原因的可能性較小,我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導管做試驗,若還仍不能達到效果,就要檢查滅菌鍋了。

          一種高效的替代方法就是使用君立康即用型管裝培養(yǎng)基。

          一、在實驗中液體渾濁的時候,傳統(tǒng)方法看不到產氣,君立康即用型管裝培養(yǎng)基自帶透視窗,可以直接查看到實驗中是否產生氣泡。

          上圖中試管最左側是傳統(tǒng)方法陰性對照,最右側是君立康的試管的陰性對照,中間的前三根試管是加了樣品后傳統(tǒng)方法看不到產氣現(xiàn)象,后三根試管是加了樣品后君立康的試管可以清晰的看到產氣現(xiàn)象


          二、試管中含有產氣收集裝置,即使在實驗前培養(yǎng)基中產生了氣泡,也可以將試管傾斜將氣泡導出。不會浪費培養(yǎng)基。

          產氣收集裝置

          傾斜排氣

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